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本产品染色灵敏度比氨基黑高5倍。尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。但蛋白质浓度超出一定范围时，对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律，用作定量分析时要注意这点。考马斯亮蓝R-250是通过范德瓦尔键与蛋白质结合，尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。它与不同蛋白质结合呈现出基本相同的颜色，并且在比较宽的范围内，扫描峰的面积与蛋白量呈线性关系。

其他名称	考马斯亮蓝R250；考马斯亮兰R250；酸性蓝83；酸性艳蓝6B；考马斯亮蓝R
CAS号	6104-59-2
分子式	C45H44N3NaO7S2
分子量	825.97
结构式
外观	暗波尔多红至暗紫棕色固体
溶解性	Water:10mg/ml,Warmed
熔点	174～180℃
最大吸收波长	586～592nm(乙醇)
储存条件	常温，避光防潮密闭干燥

• 溶液配制：
  
  • 考马斯亮蓝染色液R250配方(100mL):
    

    成分	用量
    考马斯亮蓝R250	0.25g
    甲醇	45mL
    冰醋酸	10mL
    ddH2O	45mL

    
    
  • 考马斯亮蓝脱色液配方：
    

    成分	用量
    甲醇	250mL
    冰醋酸	80mL
    ddH2O	定容至1000m

• 操作步骤：
  
  • 电泳结束后，切取少量含有MARK蛋白以及少许样品的小部分凝胶进行染色，其余部分用保鲜膜包好，放在4℃冰箱保存。取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2～4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。
    
  • 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2～3次。
    
  • 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4～24小时。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2小时后即可出现。注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
    
  • 完成脱色后，用ddH2O浸泡，至于未染色凝胶长度相等时，参照蛋白标准，与未染色凝胶对比，切下所需蛋白成分的凝胶，收集起来。然后把所要提纯的蛋白从凝胶中分离出来。